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膠體金層析和熒光免疫層析的區(qū)別?

發(fā)布時(shí)間:2023-07-07

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區(qū)別在以下幾個(gè)方面

信號(hào)物的區(qū)別:膠體金層析的信號(hào)物是1-100nm直徑范圍里的納米金顆粒,常用10-25nm,通常在520nm處有吸收峰,因此肉眼可見紅色膠體銀、膠體碳也可以歸為這類吧;熒光層析的信號(hào)物顧名思義就是發(fā)熒光物質(zhì),給與適合的激發(fā)光就能發(fā)射出相應(yīng)的熒光,不同的熒光顯示出不同的顏色,熒光物質(zhì)包括熒光蛋白、熒光化合物、熒光微球、量子點(diǎn)、上轉(zhuǎn)發(fā)光等等。

原理的區(qū)別:膠體金與抗體通過靜電吸附作用偶聯(lián);熒光物質(zhì)與抗體的偶聯(lián)則是根據(jù)熒光物質(zhì)的性質(zhì)來決定,常用的是化學(xué)偶聯(lián)。所以制備步驟也不同,膠體金探針的制備步驟簡單便捷許多,成本也低。

靈敏度:膠體金是可見光顏色信號(hào),熒光是穿透光,因此熒光層析的靈敏度要比膠體金高起碼一個(gè)數(shù)量級(jí),而且制備膠體金的控制要求高,不穩(wěn)定因素多,只能用于定性檢測,熒光物質(zhì)穩(wěn)定性要更好,因此適合用于半定量檢測,配合上檢測儀能實(shí)現(xiàn)基本定量。

特異性:膠體金與抗體通過靜電吸附,容易被樣品中的基質(zhì)影響,過酸過堿過鹽都會(huì)影響,而熒光物質(zhì)與抗體的化學(xué)偶聯(lián)等較大程度抵抗基質(zhì)的影響,因此在某些項(xiàng)目上熒光的特異性會(huì)更好些。

可用性的區(qū)別:因?yàn)闊晒饪梢杂胁煌ǘ蔚陌l(fā)射,顯示出不同顏色,可用于多指標(biāo)同時(shí)檢測,大大拓展了試紙條的應(yīng)用;膠體金就只有一種,就算標(biāo)記不同抗體,相互間的影響很大,最多只能兩三個(gè)指標(biāo)同時(shí)檢測。